INFORMACIÓN SOBRE ISAC

ISAC® es la aplicación de un tipo de diagnóstico in vitro (IVD) desarrollado mediante el análisis semi cuantitativo de inmunoglobulinas IgE del suero humano. Se combinan métodos de diagnóstico inmunológico con las ventajas de la tecnología biochip. ISAC es el primer test alérgico basado en el biochip y ha sido aprobado por las regulaciones de la Unión Europea para el diagnóstico de alergias.

El mayor componente del biochip ISAC es un substrato plano de cristal que contiene cuatro espacios individuales para la reacción (7x7mm) y diseñado para incubar 10 ul de suero. Cada espacio de la reacción está rodeado por un marco de Teflon® hidrofóbico que impide que se mezclen entre sí y se contaminen. La superficie de cristal ha sido tratada químicamente para mantener los alergénicos fijados, estables y biológicamente activos. Cada espacio puede contener hasta 400 alergénicos.

Al contrario que los métodos convencionales, ISAC emplea extractos alergénicos crudos. Utiliza exclusivamente moléculas alergénicas recombinantes o depuradas de forma natural permitiendo una mejor estandarización del diagnóstico. En numerosas publicaciones se ha demostrado la ventaja de usar paneles de moléculas alergénicas individuales.

Cada alergénico es inmovilizado por triplicado en cada uno de los cuatro espacios de reacción. Así pues los datos creados por ISAC se basan en una determinación múltiple de IgE. Tan sólo un ensayo y un análisis proporcionan diagnósticos más fiables que los sistemas convencionales.

Para la prueba ISAC® se ponen 10 ul de suero del paciente en los lugares de reacción del ISAC. Los posibles anticuerpos IgE presentes en el suero de un paciente alérgico se fijan únicamente a aquellas áreas del microarray donde el alergénico ha sido inmovilizado. La fijación de anticuerpos IgE específicos a alergénicos inmovilizados se detecta añadiendo un anticuerpo IgE antihumano con una etiqueta fluorescente. La etiqueta fluorescente se excita con un láser con una longitud de onda definida y las señales generadas se recopilan en un fotodetector. Este paso del análisis está totalmente automatizado en cada espacio de la reacción mediante un proceso de barrido. El análisis final se realiza con un software y está también automatizado.

La incubación del suero dura 2 horas y la marca con el fluorescente una hora más. Sin embargo antes de la incubación del suero y durante el proceso se realizan diferentes lavados. La completa duración del test, incluida la preparación, incubación del suero y el lavado es de unas 5 horas. En un laboratorio estándar pueden llegar a realizarse 100 pruebas ISAC al día. Esto equivale a 8000 determinaciones IgE alergénicas individuales realizadas con un sistema convencional.

La evaluación de los resultados del ISAC® se hace por ordenador. El software desarrollado específicamente para este propósito determina la posición de la señal fluorescente respecto al alergénico y respecto al lugar que se encuentra en cada espacio de reacción del ISAC. El software calcula una curva de calibración mediante la calibración del suero analizado en cada uno de los cuatro sitios. Con esta curva, las intensidades fluorescentes se transforman en concentraciones IgE sem. Cuantitativas expresadas en cual. Estos valores están expresados en forma de clases ISAC®  (bajo-moderado-alto) que corresponden a las conocidas clases RAST.

Únicamente pueden utilizarse alergenos recombinantes o naturales estrictamente seleccionados y altamente depurados. Esto permite por primera vez estandarizar diagnósticos in vitro de alergias del Tipo 1. Hasta la fecha, se incluyen 79 alergénicos (lista de alergénicos ISAC) en el ISAC CRD, cubriendo un amplio abanico de diferentes alergias. El test puede utilizarse para detectar anticuerpos IgE relacionados con el polen de la hierba o árboles, la descamación de animales, alimentos, veneno de insectos y alergénicos del moho entre otros. En alergénicos seleccionados, el ISAC se centra en los más comunes en fuentes biológicas causantes de la alergia. Para la selección de los principales alergénicos VBC-GENOMICS confía en la opinión de expertos en el campo de la alergología.

Para la implementación de las pruebas ISAC (manual del ISAC) tan sólo se requiere un equipo de laboratorio estándar. A parte, proporcionamos a nuestros laboratorios colaboradores accesorios relevantes. Para escanear biochips ISAC se necesita un escaner microarray o lector de biochips. En la actualidad, muchos hospitales y laboratorios tienen acceso a este tipo de aparatos puesto que son el mayor componente de la vida científica moderna utilizados para el estudio de la expresión genética en microarrays de ADN. CapitalBio (CapitalBio) ha creado, desarrollado y validado el ISAC utilizando lectores de biochip. En particular recomendamos LuxScan10K. Alternativamente pueden utilizarse otros escáneres. Por favor contacte nuestro centro de atención al cliente para cuestiones relacionadas con este tema.

Internet proporciona muchísima información sobre las enfermedades alérgicas en general. En nuestra página de enlaces proporcionamos una lista de referencias, pero a parte, recomendamos visite la dirección www.allergome.org tanto para especialistas como para pacientes interesados.